自由基清除活性隨著2-吡咯烷酮用量的增加而增加。發(fā)現(xiàn) 2-吡咯烷酮的細(xì)胞毒性具有劑量和時(shí)間依賴性,并在所有選定的癌細(xì)胞系中通過(guò)顯微鏡觀察到其作用。觀察到 2-吡咯烷酮的細(xì)胞毒性濃度對(duì) HeLa 為 2.5 mg/mL,對(duì) PC-3 細(xì)胞為 3 mg/mL,對(duì) HeLa 和 PC-3 細(xì)胞分別為 1.5 mg/mL,細(xì)胞毒性為 2 mg/mL PC-3 細(xì)胞的濃度分別為 48 小時(shí)。細(xì)胞隨著純化的 2-吡咯烷酮濃度的增加而降低。用 2-吡咯烷酮處理 24 小時(shí)后觀察細(xì)胞形態(tài)變化(HeLa 和 PC-3 細(xì)胞的 IC50 濃度分別為 1.5 mg/mL 和 2 mg/mL)。研究表明,2-吡咯烷酮通過(guò)細(xì)胞周期停滯的 G0/G1 期誘導(dǎo) HeLa 和 PC-3 細(xì)胞凋亡。
細(xì)胞測(cè)定 使用 MTT 測(cè)定評(píng)估抑制濃度 (IC50)。癌細(xì)胞(1 x 104 細(xì)胞/孔)在 96 孔培養(yǎng)皿中培養(yǎng) 48 小時(shí)至濃度為 75%。將培養(yǎng)基更換為濃度為(0.5~5mg/mL)的2-吡咯烷酮的新鮮培養(yǎng)基,進(jìn)一步培養(yǎng)24小時(shí)和48小時(shí)。除去培養(yǎng)基,每孔加入 100 mL MTT 溶液,37°C 孵育 4 小時(shí)。去除上清液后,每孔加入 50 mL 二甲基亞砜,孵育 10 分鐘以溶解甲臜晶體。在 ELISA 多孔板讀數(shù)器中在 620 nm 處測(cè)量光密度。 OD值用于計(jì)算存活率的百分比